Transmisyjna Mikroskopia Elektronowa: Różnice pomiędzy wersjami
(Utworzono nową stronę "=Definicja= Technika wykorzystująca rozpędzoną wiązkę elektronów przechodzącą przez preparat służąca m.in. do obrazowania morfologii i ultrastruktury wirionó...") |
|||
| Linia 1: | Linia 1: | ||
=Definicja= | =Definicja= | ||
Technika wykorzystująca rozpędzoną wiązkę elektronów przechodzącą przez preparat służąca m.in. do obrazowania morfologii i ultrastruktury wirionów fagowych i umożliwiająca określenie przynależności systematycznej badanego faga do rzędu, rodziny, morfotypu, | Technika wykorzystująca rozpędzoną wiązkę elektronów przechodzącą przez cienki preparat służąca m.in. do obrazowania morfologii i ultrastruktury wirionów fagowych i umożliwiająca określenie przynależności systematycznej badanego faga do rzędu, rodziny, morfotypu, określenia rozmiaru cząstki faga oraz elementów składowych wirionu: jego główki i ogonka, wizualizacji etapów infekcji komórki bakteryjnej, jak również określenie czy badany preparat zawiera jednorodne i kompletne cząstki fagowe. Ze względu na wysoką rozdzielczość około 0,2 nm technika ta daje możliwość powiększenia obrazu o około 1000000 razy i obserwacji cząstek fagowych i ich elementów składowych. Fagi były jednymi z pierwszych wirusów badanych w mikroskopie elektronowym <ref>Haguenau, F., Hawkes, P. W., Hutchison, J. L.'' et al''. (2003). Key events in the history of electron microscopy. Microsc. Microanal. 9:96–138.</ref> Pierwsze elektronogramy fagów (swoistych wobec ''E.coli'') były opublikowane w 1940 r w Niemczech.<ref>Ackermann HW. (2012). Bacteriophage electron microscopy. ''Adv Virus Res'' ;82:1-32. doi:10.1016/B978-0-12-394621-8.00017-0.</ref> Elektronogramy wykonuje się w ten sposób, że badane próbki są najpierw zagęszczone i oczyszczone poprzez wirowanie z dodatkiem 0,1 M octanu amonu. Następnie na siatki i błonki nośne nanoszone są badane próbki o mianie co najmniej 10<sup>8</sup>pfu/ml. Preparaty są wybarwiane negatywowo w octanie uranylu i uzyskuje się obraz dwuwymiarowy. | ||
===Bibliografia<br />=== | ===Bibliografia<br />=== | ||
Aktualna wersja na dzień 04:13, 29 wrz 2020
Definicja
Technika wykorzystująca rozpędzoną wiązkę elektronów przechodzącą przez cienki preparat służąca m.in. do obrazowania morfologii i ultrastruktury wirionów fagowych i umożliwiająca określenie przynależności systematycznej badanego faga do rzędu, rodziny, morfotypu, określenia rozmiaru cząstki faga oraz elementów składowych wirionu: jego główki i ogonka, wizualizacji etapów infekcji komórki bakteryjnej, jak również określenie czy badany preparat zawiera jednorodne i kompletne cząstki fagowe. Ze względu na wysoką rozdzielczość około 0,2 nm technika ta daje możliwość powiększenia obrazu o około 1000000 razy i obserwacji cząstek fagowych i ich elementów składowych. Fagi były jednymi z pierwszych wirusów badanych w mikroskopie elektronowym [1] Pierwsze elektronogramy fagów (swoistych wobec E.coli) były opublikowane w 1940 r w Niemczech.[2] Elektronogramy wykonuje się w ten sposób, że badane próbki są najpierw zagęszczone i oczyszczone poprzez wirowanie z dodatkiem 0,1 M octanu amonu. Następnie na siatki i błonki nośne nanoszone są badane próbki o mianie co najmniej 108pfu/ml. Preparaty są wybarwiane negatywowo w octanie uranylu i uzyskuje się obraz dwuwymiarowy.